Brucella Abortus ve Brucella Meli̇tensi̇s Enfeksi̇yonlarında Oluşan Antikorların Rhizobium Tropi̇ci̇ Anti̇jeni̇ İle Tespi̇t Edi̇lmesi̇
Brucella Abortus ve Brucella Meli̇tensi̇s Enfeksi̇yonlarında Oluşan Antikorların Rhizobium Tropi̇ci̇ Anti̇jeni̇ İle Tespi̇t Edi̇lmesi̇ Aras, Zeki; Uçan, Uçkun Sait Brucellozisin laboratuar teşhisinde bakteriyolojik, moleküler ve serolojik testler kullanılmaktadır. Brucella cinsi mikroorganizmalar, 16S rRNA sekans analizi sonucuna göre Rhizobium, Agrobacterium, Ochrobactrum türlerinin de içinde bulunduğu Proteobactereaceae'nin 2a altgrubunda yer almaktadırlar. Bu çalışmada, koyun ve sığır kan serumlarında (toplam 200 serum) bulunan B. abortus ve B. melitensis'e karşı oluşmuş antikorları teşhis etmede Rhizobium tropici (R. tropici) tüm hücre antijeni kullanıldı. R. tropici ile B. abortus ve B. melitensis arasındaki genetik-yakınlık Random Amplifiye Polimorfik DNA-PCR (RAPD-PCR) yöntemi ile araştırıldı. Hazırlanan antijenin sensitivitesi ve spesifitesi, sığır kan serumları için sırasıyla % 81.1 ve % 22.6, koyun kan serumları için ise sırasıyla % 80.1 ve % 59.5 olarak hesaplandı. RAPD-PCR analizi sonucunda, genetik benzerlik B. abortus ve R. tropici arasında % 33.3, B. melitensis ile R. tropici arasında % 46.2 ve B. abortus ile B. melitensis arasında % 72.7 olarak hesaplandı. Sonuç olarak, B. abortus ve B. melitensis ile R. tropici arasındaki genetik benzerlik RAPD-PCR kullanılarak ortaya konuldu. R. tropici'den üretilen tüm hücre antijeni ile brucellozisin serolojik teşhisinin yapılamayacağı fakat hayvanların R. tropici'ye karşı antikor geliştirebilecekleri ve bu antikorlarında Brucella serolojisinde yanlış pozitiflik sebepleri arasında yer alabileceği sonucuna varıldı.; Laboratory diagnosis of brucellosis is made by serological, molecular or cultural methods. Brucella spp., Agrobacterium, Ochrobactrum and Rhizobium all belong to the alpha-2 subgroup of Proteobacteria as revealed by studies on 16S rRNA sceqence analysis. O.anthropi has been used to diagnose brucellosis. In this study, whole cell extract from Rhizobium tropici (R. tropici) was examined for detecting antibodies to B. abortus and B. melitensis in cattle and sheep sera (200 in total), respectively. Genetic similarity between the bacteria R. tropici, B. abortus and B. melitensis was also investigated by RAPD-PCR. Using the sera from cattle, sensitivity and specificity were calculated as being 81.1% and 22.6%, respectively when the SAT considered as Gold Standard. RLAT's sensitivity for sheep sera (80.1%) was found being close to that of cattle sera (81.1%) while specivity of RLAT for sheep sera (59.5%) was quite higher than the figure for the cattle sera (22.6% ). In conclusion, use of whole cell antigen from R. tropici is not practical in sero diagnosing brucellosis in cattle and sheep. It is also considered that some antibodies to R. tropici are also mounted in the hosts contributing misunderstanding of the positivitiness in the serology.
Brucella Abortus ve Brucella Meli̇tensi̇s Enfeksi̇yonlarında Oluşan Antikorların Rhizobium Tropi̇ci̇ Anti̇jeni̇ İle Tespi̇t Edi̇lmesi̇ Aras, Zeki; Uçan, Uçkun Sait Brucellozisin laboratuar teşhisinde bakteriyolojik, moleküler ve serolojik testler kullanılmaktadır. Brucella cinsi mikroorganizmalar, 16S rRNA sekans analizi sonucuna göre Rhizobium, Agrobacterium, Ochrobactrum türlerinin de içinde bulunduğu Proteobactereaceae'nin 2a altgrubunda yer almaktadırlar. Bu çalışmada, koyun ve sığır kan serumlarında (toplam 200 serum) bulunan B. abortus ve B. melitensis'e karşı oluşmuş antikorları teşhis etmede Rhizobium tropici (R. tropici) tüm hücre antijeni kullanıldı. R. tropici ile B. abortus ve B. melitensis arasındaki genetik-yakınlık Random Amplifiye Polimorfik DNA-PCR (RAPD-PCR) yöntemi ile araştırıldı. Hazırlanan antijenin sensitivitesi ve spesifitesi, sığır kan serumları için sırasıyla % 81.1 ve % 22.6, koyun kan serumları için ise sırasıyla % 80.1 ve % 59.5 olarak hesaplandı. RAPD-PCR analizi sonucunda, genetik benzerlik B. abortus ve R. tropici arasında % 33.3, B. melitensis ile R. tropici arasında % 46.2 ve B. abortus ile B. melitensis arasında % 72.7 olarak hesaplandı. Sonuç olarak, B. abortus ve B. melitensis ile R. tropici arasındaki genetik benzerlik RAPD-PCR kullanılarak ortaya konuldu. R. tropici'den üretilen tüm hücre antijeni ile brucellozisin serolojik teşhisinin yapılamayacağı fakat hayvanların R. tropici'ye karşı antikor geliştirebilecekleri ve bu antikorlarında Brucella serolojisinde yanlış pozitiflik sebepleri arasında yer alabileceği sonucuna varıldı.; Laboratory diagnosis of brucellosis is made by serological, molecular or cultural methods. Brucella spp., Agrobacterium, Ochrobactrum and Rhizobium all belong to the alpha-2 subgroup of Proteobacteria as revealed by studies on 16S rRNA sceqence analysis. O.anthropi has been used to diagnose brucellosis. In this study, whole cell extract from Rhizobium tropici (R. tropici) was examined for detecting antibodies to B. abortus and B. melitensis in cattle and sheep sera (200 in total), respectively. Genetic similarity between the bacteria R. tropici, B. abortus and B. melitensis was also investigated by RAPD-PCR. Using the sera from cattle, sensitivity and specificity were calculated as being 81.1% and 22.6%, respectively when the SAT considered as Gold Standard. RLAT's sensitivity for sheep sera (80.1%) was found being close to that of cattle sera (81.1%) while specivity of RLAT for sheep sera (59.5%) was quite higher than the figure for the cattle sera (22.6% ). In conclusion, use of whole cell antigen from R. tropici is not practical in sero diagnosing brucellosis in cattle and sheep. It is also considered that some antibodies to R. tropici are also mounted in the hosts contributing misunderstanding of the positivitiness in the serology.